Οδηγίες Χρήσης

Προβλεπόμενη χρήση:
Η συσκευή 2019-nCoV IgG / IgM WB είναι μία γρήγορη
χρωματογραφική ανοσοδοκιμασία για την
ποιοτική ανίχνευση IgG και IgM αντισωμάτων στο 2019-nCoV, ένα
νέο στέλεχος του
coronavirus (nCoV), σε δείγματα ολικού αίματος από τρύπημα
δακτύλου. Αυτή η συσκευή δεν πρέπει να χρησιμοποιείται για
αυτοέλεγχο.
Περίληψη:
Οι κορωνοϊοί (ή κορονοϊοί ή κοροναϊοί) είναι μια μεγάλη οικογένεια
ιών που προκαλούν ασθένειες που κυμαίνονται από συχνό κρύωμα
μέχρι μια πιο σοβαρή πνευμονία. Είναι ιοί με τυλιγμένο, μονόκλωνο
RNA. Οι κορωνοϊοί (ή κορονοϊοί ή κοροναϊοί) είναι ζωονοσογόνοι,
μπορούν να μεταδοθούν από ζώα σε ανθρώπους. Τα υπάρχοντα
παραδείγματα περιλαμβάνουν τον Αναπνευστικό Ιό της Μέσης
Ανατολής (MER-CoV) και το Σοβαρό οξύ αναπνευστικό σύνδρομο
(SARS-CoV).
Οι αναφορές για ένα νέο κορωναϊό ξεκίνησαν στην Κίνα τον
Δεκέμβριο του 2019 και τον Ιανουάριο του 2020 ο Παγκόσμιος
Οργανισμός Υγείας όρισε το νέο στέλεχος 2019-nCoV (αργότερα
SARSCoV-2). Τα συμπτώματα περιλαμβάνουν υψηλό πυρετό, βήχα
και δυσκολίες στην αναπνοή. Τα συμπτώματα των
ανοσοκατεσταλμένων ατόμων μπορεί να είναι πιο σοβαρά και
μπορούν να οδηγήσουν σε πνευμονία, σοβαρό οξύ αναπνευστικό
σύνδρομο ή θάνατο.

Αρχή λειτουργίας του τεστ:

Η δοκιμαστική συσκευή έχει anti- human IgG αντισώματα και anti-
human IgM αντισώματα ακινητοποιημένα στη μεμβράνη σε δύο

ξεχωριστές περιοχές της ζώνης δοκιμής. Σωματίδια επικαλυμμένα με
αντιγόνο SARS-CoV-2 τοποθετούνται στη μεμβράνη κοντά στην
υποδοχή του δείγματος. Κατά τη διάρκεια του τεστ δείγμα ολικού
αίματος προστίθεται στην υποδοχή του δείγματος όπου
αλληλοεπιδρά με τα σωματίδια επικαλυμμένου αντιγόνου και τυχόν
αντισώματα κατά του SARS-CoV-2 που υπάρχουν στο δείγμα θα
δεσμευτούν στο αντιγόνο. Το σύμπλεγμα αντισώματος-σωματιδίων
μεταναστεύει επάνω στη μεμβράνη μέσω τριχοειδών όπου αλληλοεπιδρούν

με τα anti- human IgG αντισώματα και / ή τα anti-
human IgM αντισώματα στη ζώνη δοκιμής και συλλαμβάνονται. Ένα

θετικό αποτέλεσμα υποδεικνύεται όταν σχηματίζεται μια χρωματιστή
γραμμή στη γραμμή δοκιμών IgG και / ή IgM. Η απουσία
οποιασδήποτε γραμμής στη ζώνη δοκιμής υποδηλώνει αρνητικό
αποτέλεσμα. Για να χρησιμεύσει ως διαδικαστικός έλεγχος, μια
έγχρωμη γραμμή πρέπει εμφανίζεται πάντα στην περιοχή της
γραμμής ελέγχου που υποδεικνύει ότι ο κατάλληλος όγκος δείγματος
έχει προστεθεί και μια μεμβράνη απορρόφησης έχει εμφανιστεί.

Αντιδραστήρια:

Η συσκευή τεστ περιέχει έχει anti- human IgG αντισώματα, anti-
human IgM αντισώματα, αντιγόνο SARS-CoV-2 και IgG αντίσωμα

ποντικού κατσίκας στη μεμβράνη της συσκευής 2019-nCoV IgG / IgM WB.

Παρεχόμενα υλικά
Τεστ σε μεμονωμένα σακουλάκια Επίθεμα αλκοόλης
Σταγονόμετρο Λανσετάκι
Ρυθμιστικό δείγματος Φύλλο οδηγιών χρήσης
Μη παρεχόμενα υλικά: Χρονοδιακόπτης
Προφυλάξεις:
Για in vitro διαγνωστική χρήση μόνο από εκπαιδευμένους
επαγγελματίες.
Ακολουθήστε τις διαδικασίες καλής εργαστηριακής πρακτικής όπου
χειρίζονται δείγματα και συσκευές τεστ και όλα τα δείγματα σαν
δυνητικά μολυσματικά. Ακολουθήστε τους τοπικούς κανονισμούς για
τη σωστή διάθεση δειγμάτων.
Φοράτε προστατευτικά ρούχα όπως παλτό εργαστηρίου, γάντια μίας
χρήσης και γυαλιά ασφαλείας.
Η υγρασία και η θερμοκρασία μπορούν να επηρεάσουν αρνητικά τα
αποτελέσματα.
Αποθήκευση και σταθερότητα:
Το τεστ κιτ μπορεί να αποθηκευτεί σε θερμοκρασία δωματίου ή να
ψυχθεί (2 – 30 ̊C). Η δοκιμαστική συσκευή είναι σταθερή έως την
ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στη σφραγισμένη σακούλα. Η
συσκευή πρέπει να παραμείνει στη σφραγισμένη σακούλα μέχρι τη
χρήση. Μην καταψύχετε. Να μη χρησιμοποιείται μετά την
ημερομηνία λήξης. Η σταθερότητα του ρυθμιστικού είναι περίπου έξι
μήνες μετά το άνοιγμα της φιάλης.
Συλλογή και προετοιμασία δειγμάτων:
Το τεστ 2019-nCoV IgG / IgM WB Συσκευή πραγματοποιείται με
χρήση ολικού αίματος.Για να συλλέξετε δείγματα ολικού αίματος με
δάκτυλο: Καθαρίστε μια περιοχή του δακτύλου του ασθενούς με ένα
επίθεμα αλκοόλης. Αφήστε να στεγνώσει. Πιέστε απαλά το χέρι για
να ενθαρρύνετε τη ροή του αίματος στο δάχτυλο. Τρυπήστε το δέρμα
με μια αποστειρωμένη βελόνα/λανσετάκι και σκουπίστε το πρώτο
σημάδι αίματος. Πιέστε απαλά το δάχτυλο για να απελευθερώσει μια
μεγάλη σταγόνα αίματος πάνω από το σημείο παρακέντησης.
Συλλέξτε την σταγόνα αίματος με το σταγονόμετρο. Μην καταψύχετε
δείγματα ολικού αίματος. Το ολικό αίμα που συλλέγεται με τσίμπημα
δακτύλου πρέπει να δοκιμαστεί αμέσως.
Διαδικασία ανάλυσης:
Φέρτε τη συσκευή, τα δείγματα, το ρυθμιστικό δείγματος και τα
χειριστήρια πλήρως σε θερμοκρασία δωματίου (15 – 30 ̊C) πριν
ξεκινήσετε οποιαδήποτε δοκιμή. Αφαιρέστε το τεστ από τη
σφραγισμένη σακούλα, τοποθετήστε την σε καθαρή και επίπεδη
επιφάνεια και χρησιμοποιήστε την αμέσως.

Χρησιμοποιώντας το σταγονόμετρο πάρτε δείγμα στην άκρη του
σταγονόμετρου και διανείμετε μια μικρή σταγόνα στην υποδοχή του
δείγματος (περίπου 10 μl). Προσθέστε 2 σταγόνες ρυθμιστικού στην
υποδοχή του δείγματος (περίπου 80 μl) και ξεκινήστε το χρονόμετρο.
Δείτε την εικόνα.
Περιμένετε να εμφανιστούν χρωματιστές γραμμές. Διαβάστε τα
αποτελέσματα μεταξύ 10 και 15 λεπτών. Μην ερμηνεύεται
οποιοδήποτε αποτέλεσμα μετά από 15 λεπτά.
Ερμηνεία αποτελεσμάτων:

IgG Θετικό: Εμφανίζονται δύο ξεχωριστές έγχρωμες γραμμές. Μία
ζώνη εμφανίζεται στη γραμμή ελέγχου(C) και μια άλλη ζώνη
εμφανίζεται στη γραμμή δοκιμής IgG (IgG).
IgM Θετικό: Εμφανίζονται δύο ξεχωριστές έγχρωμες γραμμές. Μια
ζώνη εμφανίζεται στη γραμμή ελέγχου (C) και μια άλλη ζώνη
εμφανίζεται στη γραμμή δοκιμής IgM (IgM).
IgG και IgM Θετικό: Εμφανίζονται τρεις διαφορετικές χρωματιστές
γραμμές. Μια ζώνη εμφανίζεται στη γραμμή ελέγχου (C), μία ζώνη
εμφανίζεται στη γραμμή δοκιμής IgG (IgG) και μία ζώνη εμφανίζεται
στη γραμμή δοκιμής IgM (IgM).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Η ένταση της ανάπτυξης του χρώματος στις γραμμές
δοκιμής θα ποικίλει ανάλογα με
τη συγκέντρωση IgG αντι-SARS-CoV-2 ή IgM αντι-SARS-CoV-2 που
υπάρχει στο
δείγμα. Επομένως, θα πρέπει οποιαδήποτε απόχρωση χρώματος στις
γραμμές του τεστ να
θεωρείται θετικό αποτέλεσμα.
Αρνητικό: Μία έγχρωμη γραμμή εμφανίζεται στην περιοχή ελέγχου
(C). Χωρίς προφανές χρώμα
εμφανίζεται μια γραμμή στις ζώνες δοκιμής.
Μη έγκυρο: Η γραμμή ελέγχου δεν εμφανίζεται. Ανεπαρκής όγκος
δείγματος ή λανθασμένες
διαδικαστικές τεχνικές είναι οι πιο πιθανές αιτίες αποτυχίας της
γραμμής ελέγχου. Ελέγξτε το
διαδικασία και επαναλάβετε τη δοκιμή με μια νέα συσκευή δοκιμής.
Εάν το πρόβλημα παραμένει,

διακόψτε αμέσως τη χρήση του τεστ κιτ και επικοινωνήστε με τον
τοπικό σας διανομέα.
Ποιοτικοί έλεγχοι:
Ένας διαδικαστικός έλεγχος περιλαμβάνεται στη δοκιμή. Μια
χρωματιστή γραμμή που εμφανίζεται στη γραμμή ελέγχου (C) είναι ο
εσωτερικός διαδικαστικός έλεγχος. Επιβεβαιώνει επαρκή όγκο
δείγματος και σωστή διαδικαστική τεχνική. Τα πρότυπα ελέγχου δεν
παρέχονται με αυτό το κιτ.
Περιορισμοί του τεστ:
Η διαδικασία ανάλυσης και η ερμηνεία των αποτελεσμάτων
ανάλυσης πρέπει να ακολουθούνται στενά κατά τη διάρκεια του τεστ
για την παρουσία αντισωμάτων κατά του SARS-CoV-2 σε ολικό αίμα,
ορό ή πλάσμα από μεμονωμένα άτομα. Η αποτυχία να ακολουθήσετε
τη διαδικασία μπορεί να δώσει ανακριβή αποτελέσματα.
Το τεστ 2019-nCoV IgG / IgM WB Συσκευή περιορίζεται στην ποιοτική
ανίχνευση αντισωμάτων antiSARS-CoV-2 IgG και IgM σε πλήρες αίμα.
Η ένταση της ζώνης δοκιμής δεν έχει γραμμική συσχέτιση με την
συγκέντρωση αντισώματος στο δείγμα.
Ένα αρνητικό αποτέλεσμα για ένα μεμονωμένο άτομο υποδεικνύει

την απουσία ανιχνεύσιμου επιπέδου αντι-SARS-CoV-2 IgG και αντι-
SARS-CoV-2 IgM αντίσωμα ή ότι τα αντισώματα δεν είναι

παρόντα κατά τη διάρκεια του σταδίου της νόσου στο οποίο
συλλέχθηκε το δείγμα. Ωστόσο, ένα
αρνητικό αποτέλεσμα του τεστ δεν αποκλείει την πιθανότητα
έκθεσης ή μόλυνσης με τον ιό SARS-CoV-2.
Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται με αυτό το τεστ δεν πρέπει να
χρησιμοποιούνται ως το μοναδικό κριτήριο για τη διάγνωση της
λοίμωξης SARS-CoV-2 αλλά να χρησιμοποιείται σε συνδυασμό με
άλλες διαγνωστικές διαδικασίες και κλινικά ευρήματα.
Η τιμή του αιματοκρίτη των δειγμάτων πλήρους αίματος μπορεί να
επηρεάσει τα αποτελέσματα των δοκιμών. Για ακριβή αποτελέσματα
το επίπεδο του αιματοκρίτη πρέπει να κυμαίνεται μεταξύ 25% και
65%.
Χαρακτηριστικά απόδοσης:
Το τεστ 2019-nCoV IgG / IgM WB Συσκευή συγκρίθηκε με μια
εμπορική ενζυμική δοκιμή ανοσοπροσρόφησης και τα αποτελέσματα
δείχνουν υψηλή ειδικότητα και ευαισθησία.

IgG αποτελέσματα

Ευαισθησία: 91,08% (95% διάστημα εμπιστοσύνης :74.5%-98.9%)

Ακρίβεια: 96.4% (95% διάστημα εμπιστοσύνης: 93.1%-98.6%)

Συνολικό ποσοστό κλινικής σύμπτωσης: 95 %(95% διάστημα εμπιστοσύνης: 93,5%-97,07%)

 

IgM αποτελέσματα

Ευαισθησία: 95.7% (95% διάστημα εμπιστοσύνης :90.3%-97.9%)

Ακρίβεια: 97.3% (95% διάστημα εμπιστοσύνης: 94.9%-98.6%)

Συνολικό ποσοστό κλινικής σύμπτωσης: 96.7 %(95% διάστημα εμπιστοσύνης: 93,1%-98.6%)

 

Διασταυρούμενη αντιδραστικότητα

Το τεστ 2019-nCoV IgG / IgM WB Συσκευή έχει δοκιμαστεί χρησιμοποιώντας δείγματα θετικά για άλλες ασθένειες που σχετίζονται με πυρετό, βήχα και άλλα αναπνευστικά συμπτώματα, συμπεριλαμβανομένου του ιού κατά της γρίπης Α, του ιού της αντι-Mycoplasma πνευμονίας, του ιού της αντι-Streptococcus πνευμονίας και του anti-HCV ιού. Αυτά τα δείγματα, θετικά για την αντίστοιχη ασθένειά τους, δεν έδειξαν διασταυρούμενη αντιδραστικότητα στο τεστ 2019-nCoV IgG / IgM WB Συσκευή.

Αναφορές

1. Δήλωση του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας σχετικά με το σύμπλεγμα περιπτώσεων πνευμονίας στο Γουχάν της Κίνας: 9 Ιανουαρίου 2020.

2. Weiss SR, Lebowitz JL. Coronavirus pathogenesis. Adv Virus Res 2011;81:85-164. 3. World Health Organisation. Coronavirus. www. who.int/health-topics/coronavirus

Γλωσσάριο συμβόλων